siPOOL文庫:改進和節省您的RNAi篩選實驗
siPOOL文庫中的每個基因均被混池化的30條siRNA靶向
為什么要做RNA干擾(RNAi)?
RNA干擾(RNAi)是一種廣泛用于研究基因功能的基因沉默工具。這是由于它擁有多種優勢:易于使用、適用于各種細胞類型、類似藥物的特性、可快速獲得結果等。然而,合成的短干擾RNA(siRNAs)通常會存在脫靶效應,這將導致實驗結果的不穩定,因此后續還需要開展更多的驗證工作,既費時又費力。 如果采用高復雜度的siRNAs池(簡稱siPOOLs),可以大大降低脫靶效應,進一步提高RNAi方法在基因功能研究中的可靠性和效率。
siPOOLs如何提高特異性?
siPOOLs是由優化設計合成的30條siRNA組成的復雜混池。采用高復雜度的混池方法,使每條siRNA的濃度均相應降低,致使特異性siRNA的脫靶效應得以稀釋。相反地,siPOOLs具有較高的轉錄組覆蓋率,可以進一步提高基因敲除的效率。由此產生的功能表型結果也更加的可靠,重復性也更好。
左:在相對較高的濃度下使用單個siRNA或低復雜度siRNA池,以實現有效的敲除。然而,高濃度可能會導致普遍的脫靶效應,從而產出易變的結果。右:siPOOLs是由30條特定的siRNAs構成的復雜混池,具有不同的種子序列,能夠較大限度地覆蓋靶標基因。采用混池化方法將每條siRNA的濃度降低。較低的濃度可有效消除脫靶效應,并提高基因沉默結果的可靠性。
我們提供專業的技術支持
我們的團隊是由具備多年RNAi篩選經驗的專家組成,在siRNA設計和RNAi篩選數據分析(包含siRNA和基于shRNA的篩選)方面有深入的專業研究,可以為您的RNAi檢測開發和篩選研究提供科學、專業的技術支持。
與時俱進的siPOOL文庫
為了確保siPOOLs針對當前注釋的基因,設計團隊會根據新版的RefSeq注釋不斷更新siPOOL的設計。
產品名稱 | 物種 | 規格 | 產品編號 |
---|---|---|---|
E3 Ligase siPOOL library E3連接酶siPOOL庫 | human | 1 nmol | si-L010-000E3L |
human | 0.5 nmol | si-L005-000E3L | |
human | 0.25 nmol | si-L002-000E3L | |
human | 0.1 nmol | si-L001-000E3L | |
Kinase siPOOL library 激酶siPOOL庫 | human | 1 nmol | si-L010-000505 |
human | 0.5 nmol | si-L005-000505 | |
human | 0.25 nmol | si-L002-000505 | |
human | 0.1 nmol | si-L001-000505 | |
RNA-binding protein siPOOL library RNA結合蛋白siPOOL庫 | human | 1 nmol | si-L010-000RBP |
human | 0.5 nmol | si-L005-000RBP | |
human | 0.25 nmol | si-L002-000RBP | |
human | 0.1 nmol | si-L001-000RBP | |
GPCR siPOOL library GPCR siPOOL庫 | human | 1 nmol | si-L010-00GPCR |
human | 0.5 nmol | si-L005-00GPCR | |
human | 0.25 nmol | si-L002-00GPCR | |
human | 0.1 nmol | si-L001-00GPCR | |
Ubiquitinase siPOOL library 泛素化酶 siPOOL庫 | human | 1 nmol | si-L010-000UBI |
human | 0.5 nmol | si-L005-000UBI | |
human | 0.25 nmol | si-L002-000UBI | |
human | 0.1 nmol | si-L001-000UBI |
通常,siPOOLs產品采用攜帶條形碼的離心管。也可根據客戶需求定制96孔板或384孔板布局的siPOOLs產品。
運輸和保存
siPOOL庫,以懸液的形式保存,常溫(RT)下運輸。如有特別要求,siPOOL也可以干粉形式運輸。siPOOL庫可以穩定地在RT下運輸至少4周。到達后,siPOOL庫應存儲在-20℃至-80℃。在這樣的條件下,siPOOL庫至少穩定保存兩年。如果siPOOL庫以干粉形式運輸,siPOOL需采用無RNase的水進行重懸。
在客戶收到(或重懸)siPOOLs產品后,我們建議您將siPOOLs分裝成小體積,存儲在-20℃到-80℃條件。為了達到最佳效果,盡量減少反復凍融的次數。在良好的儲存條件以及規范的操作處理下,siPOOLs可穩定保存至少2年。
引用文獻
Hannus M. et. al.: siPools: highly complex but accurately defined siRNA pools eliminate off-target effects. Nucleic Acids Res 42(12): 8049-61(2014)
Marine S. et. al.: Common Seed Analysis to Identify Off-Target Effects in siRNA Screens. Journal of Biomolecular Screening 1-9 (2011)
Jackson A. et. al.: Expression Profiling reveals off-target gene regulation by RNAi. Nature Biotechnology (2003)
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